1. 本选题研究的目的及意义
稻曲菌(Aspergillusoryzae)作为一种重要的工业微生物菌种，在食品发酵、酶制剂生产和生物技术领域中有着广泛的应用。
分生孢子是稻曲菌进行无性繁殖的主要方式，其形成效率直接影响着稻曲菌的生产应用。
因此，深入研究稻曲菌分生孢子形成的分子机制，对于提高稻曲菌的生产效益以及开发利用稻曲菌资源具有重要意义。
2. 本选题国内外研究状况综述
稻曲菌作为重要的工业微生物菌种，其分生孢子形成机制一直是国内外研究的热点。
近年来，随着分子生物学技术的发展，越来越多的研究开始关注参与稻曲菌分生孢子形成的关键基因及其调控网络。
1. 国内研究现状
3. 本选题研究的主要内容及写作提纲
本研究将利用分子生物学、细胞生物学和遗传学等手段，构建稻曲菌SMEK基因敲除突变体，并对其表型进行分析，探究SMEK基因在稻曲菌生长发育，特别是分生孢子形成过程中的功能，并初步探讨其可能的分子机制。
1. 主要内容
1.构建稻曲菌SMEK基因敲除载体：根据稻曲菌SMEK基因序列设计引物，PCR扩增SMEK基因上下游同源臂，并分别克隆至自杀性载体，构建含有筛选标记基因的SMEK基因敲除载体。
4. 研究的方法与步骤
1.菌株培养和条件摸索：利用PDA培养基活化稻曲菌野生型菌株，并根据预实验结果，确定适合稻曲菌生长和分生孢子形成的最适培养基、温度、pH值和光照等条件。
2.SMEK基因敲除载体构建：根据已发表的稻曲菌基因组序列，设计特异性引物，以稻曲菌基因组DNA为模板，PCR扩增SMEK基因的上下游同源臂。
将扩增产物分别克隆至自杀性载体pBluescriptSK( )中，并插入筛选标记基因HygromycinBresistancegene，构建SMEK基因敲除载体。
5. 研究的创新点
1.首次在稻曲菌中对SMEK基因进行敲除和功能分析，填补了该领域的研究空白。
2.结合表型观察和分子生物学技术，系统地研究SMEK基因在稻曲菌分生孢子形成过程中的功能和作用机制。
3.为利用基因工程技术定向改造稻曲菌，提高其分生孢子产量，进而提高稻曲菌发酵产品的生产效率提供新的思路和策略。
6. 计划与进度安排
第一阶段 （2024.12~2024.1）确认选题，了解毕业论文的相关步骤。
第二阶段（2024.1~2024.2）查询阅读相关文献，列出提纲
第三阶段（2024.2~2024.3）查询资料，学习相关论文
7. 参考文献（20个中文5个英文）
[1] 刘慧. 基于丝裂原活化蛋白激酶信号通路关键基因的稻瘟病抗性机制[D]. 南京: 南京农业大学, 2020.
[2] 方俊, 谢放, 张吉斌, 等. 真菌MAPK信号通路及其生物学功能研究进展[J]. 生物技术通报, 2017, 33(9): 1-8.
[3] 黄亚敏, 孙庆艳, 潘雪冬, 等. 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)级联反应及其在植物抗真菌病害中的作用[J]. 植物生理学报, 2019, 55(11): 2013-2023.
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