江苏某地屠宰场2019年度猪链球菌流行病学调查开题报告

 2023-02-19 20:33:19

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

猪链球菌（Streptococcus suis）是猪链球菌病的主要病原，可引起猪的关节炎、脑膜炎、肺炎，败血病，心内膜炎，脑炎，多发性浆膜炎，流产和脓肿等疾病[1]，给世界范围内的养猪业造成相当大的经济损失，仅在美国因猪链球菌感染造成的经济损失就超过3亿美元[2]。猪链球菌血清型众多，根据荚膜多糖（CPS）抗原性的差异，猪链球菌可分为29个经典血清型、27种新CPS基因簇菌株以及未知血清型菌株。迄今，能感染人的血清型有9种，分别为2型、4型、5型、9型、14型、16型、21型、24型、31型[3]。其中，猪链球菌2型对猪和人致病力最强，它可引起人的脑膜炎，可能导致永久性听力丧失，败血病和心内膜炎[3]。1998年江苏省和2005年四川省爆发的猪链球菌感染疫情正是SS2引起的，分别导致14人和38人死亡[4,5]。而且，目前猪链球菌是引起越南、泰国成人脑膜炎主要病原[6]，同时也是我国香港地区获得性肺炎的第三大病原[7]。在2002年至2013年期间，全球范围内确定的1642例人感染猪链球菌病例中，亚洲占90.2％、欧洲占8.5％、全球其他地区占1.3％[8]。

表观健康猪携带猪链球菌的阳性率较高，且同一头猪可携带多种血清型，是潜在的传染源。因此对屠宰场表观健康猪定期进行猪链球菌带菌情况监测，是猪链球菌病流行病学调查的重要方法之一。2014-2016年新疆库尔勒市部分猪场猪链球菌病发病率约为25.0%，主要流行1、2型[9]；2017年广东地区屠宰场猪群猪链球菌的阳性率为32.10%，主要流行2、3、19型[10]；2016年下半年江苏省猪场的猪链球菌的检出率较高为60.42%，主要流行1、7、8、9、21型等[11]。2014年西班牙伊比利亚猪的猪链球菌分离率为48.4%，主要流行1、2、9型[12]；2018年加拿大安大略省的农场，在保育猪中83％的健康猪和74％的患病猪的猪链球菌或猪链球菌样细菌呈阳性，71％的健康母猪和91％的健康乳猪的猪链球菌或猪链球菌样细菌呈阳性，且可以从46％的健康育肥猪的扁桃体（拭子或组织）中回收猪链球菌或猪链球菌样细菌，健康猪中主要流行血清型为5、9、16、21、27、28、29和31[13]。

本研究通过对江苏某地屠宰场2020年猪链球菌流行病学调查，并与2017-2019年该地区屠宰场猪链球菌流行病学数据进行比较分析，为了解该地区猪链球菌病的发病规律、制定该地区猪链球菌病的防控策略提供参考。

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2. 研究的基本内容和问题

研究目标：

1、通过对江苏某屠宰场进行猪链球菌的分离鉴定，了解该地区猪链球菌流行情况，为该地区猪链球菌病的防控提供参考。

2、对分离出的猪链球菌菌株进行PCR分型，进一步汇总分析猪链球菌的流行病数据。

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3. 研究的方法与方案

研究方法：

1、扁桃体样品的采集

一人以背靠方式固定好猪头使其下颌部向上，另一人一只手拉住断颈后残留食管，另一只手用灭菌后的手术刀从断颈气管靠近口腔一侧剖开，翻开会厌软骨，暴露出潜藏在下颌联合部的软腭扁桃体，在扁桃体上上下左右各划一道，再从基底部划一刀，取出约3/4扁桃体。

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4. 研究创新点

该研究有助于了解该地区猪链球菌流行情况，为该地区猪链球菌病的发展流行规律、制定该地区猪链球菌病的防控策略提供参考。

5. 研究计划与进展

研究计划：

在江苏省某屠宰场连续采集2次猪扁桃体样品，样品处理后用选择性培养基进行细菌增殖培养，然后以看家基因谷氨酸脱氢酶基因gdh和DNA修复蛋白基因recN作为猪链球菌种特异性基因进行PCR扩增，二者均为阳性的判定为猪链球菌。阳性样品进行纯化，分离出猪链球菌单菌落。采用特异性引物对分离出的猪链球菌单菌落对进行PCR分型。结合课题组前期2017-2019年分离鉴定的猪链球菌血清型分析，进行比较分析，总结流行趋势。

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